martes, 29 de diciembre de 2009

“HÉROES EN LA ESCENA DEL CRIMEN: EL USO DEL LUMINOL Y EL BLUESTAR EN MANCHAS LATENTES DE SANGRE EN ESCENAS DEL CRIMEN”


"Largo y escabroso es el camino que del infierno conduce a la luz"
Dante Alighieri
INTRODUCCIÓN

Un famoso escritor de cuna italiana –quien no conoce al autor de La Divina Comedia, don Dante Alighieri– escribió alguna vez: largo y escabroso es el camino que del infierno conduce a la luz; y esta frase es perfectamente aplicable al quehacer realizado por los peritos forenses quienes, en el hallazgo de evidencias físicas en las escenas de los crímenes más violentos y sangrientos, hacen denodados esfuerzos por recuperar el “material” necesario que pueda ser utilizado en el reconocimiento, identificación e individualización de los posibles autores del crimen.

En ese sentido, y con mucha frecuencia, los bien llamados “forenses” se han llevado, para desgracia de ellos, la muy ingrata sorpresa de encontrar que en la escena del crimen las ropas manchadas de sangre durante un acto violento (homicidio, violación sexual, tortura, etc.) son limpiadas y –no muy pocas veces– lavadas para tratar de eliminar los vestigios del ilícito. Sin embargo, y en favor de la Criminalística, existen insumos químicos –verbi gratiae, el Luminol, la Fluoresceína, y últimamente con muy buenos resultados, el Bluestar– que han permitido descubrir estas imperceptibles manchas ocultas y/o lavadas de las escenas de los hechos criminosos, logrando con la aplicación de estos reactivos la identificación de restos de sangre que han favorecido enormemente el reconocimiento de los criminales merced al análisis del ADN mediante PCR: se ha dotado a la Criminalística de la posibilidad de estudiar los indicios mínimos que, con otros métodos, serían imposibles –literalmente– de analizar.

El presente trabajo se plantea el objetivo de explicar la naturaleza y beneficios de los reactivos más utilizados en el reconocimiento de manchas latentes de sangre en escenas del crimen; sin más que agregar, desarrollaremos lo que nos convoca.

1. ESCENA DEL CRIMEN: CUESTIONES GENERALES

Tradicionalmente los doctrinarios han señalado que la escena del crimen es el sitio o espacio en donde se ha cometido un acto ilícito, en donde se encuentran… las evidencias
[2]; asimismo, es la fuente por excelencia de los indicios pesquisables inmediatamente capaces de posibilitar el esclarecimiento del hecho.[3] Ciñéndose también a la doctrina, la Guía de Procedimientos Criminalísticos de la PNP[4] refiere que el escenario del delito –denominación que también es acogida para referirse a la escena del crimen– es el lugar en donde se ha desarrollado un hecho que puede ser delito y que amerita una investigación policial.
Las múltiples definiciones presentadas en los, no menos, diversos manuales y tratados que versan sobre el tema han intentado, en alguna medida, solucionar las divergencias y problemas presentados en cuanto a la naturaleza, propiamente dicha, de la escena del delito; y a pesar de todas las contradefiniciones existentes, todas ellas han coincidido en que necesariamente –en la escena del delito– debe de existir un espacio determinado en el cual se realizó el acto presumiblemente delincuencial.
Frente a esta inmensa gama de concepciones, y para fines didácticos, hemos optado por referirnos particularmente a la postura del maestro RODRÍGUEZ REGALADO
[5], quien señala que la escena del crimen es aquel espacio en el que se ha llevado a cabo la comisión de un acto calificado como delito, el mismo que puede o no dejar como resultado evidencias físicas, las que a su vez pueden o no estar focalizadas en ese mismo lugar.

2. ESCENA DEL CRIMEN: UNA SITUACIÓN SANGRIENTA

Los sujetos implicados en una acción típicamente criminal, con no muy poca frecuencia, y con el fin de permanecer impunes a todo castigo de la ley, intentan hacer desaparecer –mediante los lavados de la escena u otro similar– cualquier indicio que pueda ser utilizado como prueba de su participación en el hecho criminoso.
Afortunadamente para la Criminalística –esta ciencia tan fecunda que integra las diferentes áreas del saber científico aplicables a la investigación del delito, a fin de establecer por el estudio y/o análisis de los indicios o evidencias, el móvil, las pruebas, las circunstancias y los medios empleados para su ejecución, así como la identificación del autor o autores
[6]– merced al análisis del ADN mediante PCR es plausible la posibilidad de estudiar los indicios imperceptibles de la sangre borrados de la escena del crimen; de hecho, y como bien señala CASTELLÓ PONCE[7], ya se han publicado interesantes investigaciones que ilustran claramente el cómo es que se consigue extraer y analizar ADN de manchas de sangre “lavadas” en la escena del delito.

3. LOS HÉROES DE LA ESCENA: EL LUMINOL, LA FLUORESCEÍNA Y EL BLUESTAR
3.1.EL LUMINOL

3.1.1. CUESTIONES GENERALES

La sabia naturaleza muestra algunos casos curiosos de manifestación química lumínica: las luciérnagas, y en el mar, los seres marinos luminiscentes que alumbran la penumbra marina de los fondos oceánicos. Frente a esta situación, científicos de todos los tiempos –NICOLÁS MONARDES, analizó un trozo de madera que emitía una peculiar fosforescencia azulada; estos experimentos fueron también de conocimiento de BOYLE, NEWTON y otros científicos, quienes no pudieron dar con la clave de tan interesante espectáculo de la natural[8]– se hicieron un importante cuestionamiento: ¿qué es lo que les hace ser tan especialmente curiosos y brillantes?
Hacia mediados del siglo XIX, SIR GEORGE GABRIEL STOCKES utilizo por vez primera el término "fluorescencia" para designar los fenómenos de luminiscencia. En esa misma línea de investigación, EILHARDT WIEDEMANN, taxonomizó los fenómenos luminosos según su origen térmico en: "incandescencia" y "luminiscencia", siendo el primero el efecto de emisión de luz producido por el dramático aumento de temperatura; y el segundo la "luz fría".
Los avances tecnológicos y el aumento del conocimiento en ciencias como la Química y la Medicina, hacia 1937, hicieron posible la utilización de reactivos como el Luminol. WALTER SPECH –importante científico y catedrático de la Universidad de Medicina Legal y Criminalística de Jena (Alemania)– en el mismo año fue uno de los pioneros en el uso del Luminol en pruebas de detección de sangre sobre distintas superficies: pavimentos, ladrillos, paredes, etc. encontrando gran efectividad en el uso del reactivo al detectar sangre en la mayoría de estas pruebas, e incluso en aquellas superficies en las que previamente se habían limpiado concienzudamente hasta 5 veces. La iniciativa de SPECH vino dada por la escasa obtención de indicios y evidencias sanguíneas en escenas de crímenes en las que el criminal manipulaba eliminando este tipo de restos biológicos
[9].
Merced a estos descubrimientos, es que ya desde 1951, el uso del Luminol comienza a tomar fuerza, perfilándose como un importante aporte pragmático en la investigación criminal. Actualmente, existen dos variantes de obtención de Luminol aplicables a la investigación: por un lado la forma casera mediante la fórmula de WEBER; por otro la forma comercial mediante los distintos preparados y presentaciones.
La empresa más conocida actualmente es
BLUESTAR FORENSICS, conocida principalmente por haber eliminado parte del retardo en la reacción y por la facilitación del manejo del producto en comprimidos y líquidos en envases idóneos para su uso y almacenamiento. La formula mejorada de Bluestar se debe al estudio de Loic Blum, profesor de Bioquímica de la Universidad Claude Bernard-Lyon, el cual financió el director de la empresa Bluestar, Jean-Marc Lefebvre-Despeaux.[10]

3.1.2. COMPOSICIÓN QUÍMICA Y APLICACIONES

El Luminol (C8H7N3O2) tiene una capacidad mas que considerable para la detección de sangre, ya sea esta fresca o seca pues se ha podido comprobar su efectividad en casos en los cuales se han encontrado pruebas mediante este compuesto 7 años después de la comisión del crimen, además, su poder de quimioluminiscencia es superior en presencia de sangre seca con lo que se revaloriza esta potente herramienta con poder como para detectar 1μL (1 μL = 10–6 L = 1 mm3) de sangre en 1L de solución[11].
Su preparación debe realizarse una vez se decida aplicarse, a cuanto menor tiempo pase desde su preparación a su aplicación mejores resultados dará el producto ya que una vez hidratado el Luminol
[12], propiamente dicho , comenzará a degradarse hasta el punto de que sea inservible. La culminación de la fase de Inspección Técnico-Ocular por parte de los forenses será el punto de partida para la recién aplicación del reactivo, teniendo cuidado de no contaminar las demás evidencias que aun no han sido recabadas de la escena. La aplicación del Luminol obedece a situaciones en las cuales se tenga presunción suficiente –debido a la desaparición sospechosa de personas– de asesinato u homicidio, en lugares con marcado indicio de ser el escenario principal de un acontecimiento de estas características, lugares tales como vehículos, recipientes, bolsas, arcones, baúles, objetos sospechosos de ser utilizados para atentar de forma directa contra la integridad física de otra persona, puntos de eliminación de pruebas como desagües, wáteres, cubos de basura etc. así como cualquier otro objeto y/o lugar sospechoso de haber entrado en contacto con la sangre de una persona ya fuere este contacto directo o indirecto e "invisible", a una primera o segunda concienzuda inspección ocular.[13]
La solución de Luminol se combina con hidróxido de sodio o hidróxido de potasio como agentes alcalinos, los cuales se diluyen en una solución oxidativa de agua destilada y H2O2 (agua oxigenada), el proceso de reacción química se realizara una vez entre en contacto con el catalizador, que en el caso que nos ocupa será en hierro (Fe) que se encuentra en el heme de la globulina, el cual es un pigmento compuesto de hierro que da el color rojo característico a la sangre y en el que a su vez se fija el oxigeno o el dióxido de carbono al glóbulo rojo o hematíe para transportarlo mediante el sistema circulatorio a las células que así lo necesiten. La reacción del Luminol con los grupos heme de la hemoglobina (o desoxihemoglobina) donde se encuentra el hierro viene dada por la mezcla del Luminol y el medio alcalino al que se le somete con el peroxido de hidrogeno (H2O2), de esta forma se reemplazan y liberan los dos átomos de nitrógeno, llevándola a un estado de excitación en el cual, al entrar en contacto con el catalizador desprenderá energía en forma de luz (fotones) produciéndose una luz azul tenue a la vez que brillante que nos indicara la presencia de metales en esa zona en la que se ha aplicado, pues aunque lo que se busca realmente el hierro que contiene la sangre, la mezcla de Luminol reacciona con los denominados metales de transición como el cloro, el cobre, potasio, cobalto, etc. lo que podría llevar a falsos positivos.
[14]
La experimentación puede hacer posible la distinción entre falsos positivos y los verdaderos indicios que apuntan a que en ese determinado lugar ha habido sangre. Comúnmente, los productos de limpieza que contienen metales de transición, alcalinos...(en su gran mayoría los clorados), son los mas utilizados en la limpieza del hogar así como los que mas a mano están con intención de eliminar pruebas. La presencia de estos productos pueden reaccionar con el Luminol dando una reacción inmediata e intensa, mostrando un brillo característicos, no ocurre así lo mismo con la sangre, ya que suele tardar un poco mas, entre 20 segundos y un minuto, además, la intensidad de la luz suele tardar unos minutos en desvanecerse, no de forma casi repentina como el caso de los productos clorados. En el caso de la reacción con sangre, el Luminol produce mas intensidad en brillo que otros elementos como lo puede ser el sulfato de cobre (II) y el hexacianoferrato de potasio (III), sus reacciones son muy parecidas a las de los productos clorados, si bien su duración de brillo e intensidad son unos pocos segundos por encima de estos últimos, no sucede lo mismo con el nitrato de cobalto (II), el cual puede permanecer en reacción durante aproximadamente unos 20 minutos, tiempo muy por encima de lo que ocurre con el hierro de la sangre.
[15]

3.2. EL BLUESTAR: REACTIVO REVELADOR PARA MANCHAS DE SANGRE OCULTA

Uno de los reactivos de mayor aceptación por parte de los peritos forenses es, sin lugar a dudas, el Bluestar. Este novísimo reactivo tiene la particularidad de revelar manchas de sangre que han sido lavadas, limpiadas ó son invisibles a simple vista.
[16]

En el año 2000, Jean-Marc Lefebvre-Despeaux, presidente de BlueStar, encargo a LOIC BLUM –profesor de Bio-química en la Universidad Claude Bernard-Lyon y director de Enzimática E Ingeniería Biomolecular del laboratorio– encontrar una nueva fórmula que sería a base de Luminol y eliminara todos los numerosos inconvenientes. Como resultado de ello, BLUM descubrió esta nueva fórmula que fue posteriormente llamada Bluestar.
La formulación de Bluestar está basada en la quimioluminiscencia, utiliza los principios de Luminol pero llevados a otro nivel de desarrollo. Un sector grande del ámbito forense tiene en muy balta consideración a este reactivo, llegando a calificarlo como el revelador más efectivo de sangre humana disponible en el mercado, tanto para la escena de un crimen como para los departamentos de criminalística.
[17]

Estudios realizados afirman que la composición del Bluestar no altera la identificación del ADN de la sangre revelada en la escena del crimen, esto facilita enormemente los análisis del genotipo sanguíneo.


3.2.1. COMPOSICIÓN QUÍMICA Y REACCIONES

El Bluestar obedece a los mismos principios químicos de reacción del clásico Luminol. La constitución del Bluestar ha hecho posible eliminar los inconvenientes de los elementos asociados al Luminol.
[18] El Luminol (3-Aminophthalhydrazide) fue sintetizado por primera vez en 1853. Su propiedad para producir una reacción quimio-luminiscente en una solución básica en presencia de un agente oxidante en contacto con la sangre fue observada por primera vez por ALBRECHT en 1928.[19]

Los principales componentes capaces de catalizar esta reacción de emisión de luz son los metales de transición y hem peroxidasa. Hem es una estructura bioquímica que forma parte integrante de la peroxidasa. Esta estructura esta igualmente presente en la hemoglobina.
De esta manera, la presencia de hemoglobina –por lo tanto, de la sangre– puede ser revelada por el aprovechamiento de la capacidad de haem/hem para catalizar la propiedad quimio-luminiscentes del Luminol. En otras palabras, una mezcla de luminol + agente oxidante + agente alcalino, cuando se pongan en contacto con la sangre, se emiten luz.

3.2.2. APLICACIÓN EN LA ESCENA DE UN CRIMEN

La aplicación del reactivo se ciñe al cuidado en la preparación de la escena a ser rociada, teniendo en cuenta las consideraciones siguientes:

a) Es necesario oscurecer el área para el tratamiento con Bluestar.
b) El Técnico tiene que utilizar una vestimenta especial, que evite la contaminación.
c) Se realiza la preparación del Bluestar.
d) La mezcla de trabajo se prepara añadiendo simplemente TRES tabletas de catalizador en la botella de solución líquida suministrada en el estuche.
e) Unos minutos más tarde, el técnico tiene que comprobar la efectividad del producto preparado, mediante una muestra de sangre cómo control positivo.
f) A partir de este instante, el técnico puede utilizar el Bluestar para detectar superficies, incluso después de haber sido lavadas con posterioridad a la exposición de sangre. El efecto de la luminiscencia es inmediato, sin embargo este desaparece en promedio al minuto y es necesaria una nueva rociada del producto.

3.2.3. EFECTO DEL BLUESTAR EN LAS PRUEBAS DE ADN

Los estudios han demostrado que Bluestar no interfiere con las pruebas de tipificación de ADN. Además de todo esto, se puede utilizar sobre muchas superficies, que hayan sido tratadas con detergentes, lo cual no las afecta en lo más mínimo.
El Bluestar fue utilizado en la escena de muchos crímenes, y las áreas azuladas, fueron enviadas a varios departamentos de Criminalística. Estos departamentos de Biología Molecular fueron capaces de lograr un perfil del ADN en todas las pistas tratadas con Bluestar. El departamento de criminalística de la Gendarmería Francesa (IRCGN) ha estado usando este procedimiento desde principios del año 2001.
[20]

A MANERA DE CONCLUSIÓN

De todo lo desarrollado en líneas anteriores podemos señalar que el Luminol es un reactivo altamente sensible que facilita enormemente la localización de manchas de sangre “invisibles”. Asimismo es importante anotar que su aplicación sobre manchas de sangre visibles no impide el análisis de ADN por PCR. Sin embargo, las pruebas en manchas de sangre imperceptibles respecto al análisis del ADN por PCR obtenidas mediante la ayuda del Luminol aún no son del todo concluyentes.
Por otro lado, el Bluestar –formulación que utiliza los mismos principios reactivos de luminiscencia en fluidos sanguíneos- ha demostrado ser un producto que emite su clásica luminiscencia azulada durante más tiempo, con más intensidad, permitiendo, así, tomar fotografías del tratamiento de forma más fácil y precisa. Aunque tiene un ligero efecto corrosivo, el Bluestar no es nocivo, lo cual significa, que un técnico de criminalística puede utilizarlo con facilidad. Finalmente, los estudios han demostrado que el uso del Bluestar en la escena del crimen no dificulta el análisis de ADN en las manchas de sangre detectadas, incluyendo las imperceptibles o borradas.

MATERIAL CONSULTADO
  • CASTELLÓ PONCE, A. y otros. “Revelado de manchas latentes: efectividad del luminol y evaluación de su efecto sobre el estudio del DNA.”; en CUADERNOS DE MEDICINA FORENSE Nº28, Sevilla. Abril, 2002. En línea, disponible en: http://scielo.isciii.es/pdf/cmf/n28/original2.pdf
  • CIENCIA FORENSE 2007-2009, Revista On Line, Chile. Disponible en: http://www.novakit.com/Bluestar.htm, http://www.bluestar-forensic.com/
  • J. JAKOVIC, Cathy. “STR analysis following latent blood detection by Luminol, Fluorescein, and BlueStar”; en JOURNAL OF FORENSIC IDENTIFICATION 57 (2), 2007.
  • GUTIÉRREZ CHÁVEZ, Abel. “Manual de Ciencias Forenses y Criminalística”, 2º Edición. Trillas. México, 2002.
  • POLICIA NACIONAL DEL PERÚ. “Guía de Procedimientos Criminalísticos”. Lima, 2005.
  • POLICIA NACIONAL DEL PERÚ. “Manual de Criminalística”. Dirección de Criminalística. Lima, 2006.
  • RODRÍGUEZ REGALADO, Pablo. “Criminalística General, Material de Consulta”. UNSA, Escuela de Postgrado. Arequipa, 2009.
  • http://ellaboratoriodegwen.blogspot.com/2008/08/luminol-la-confidencia-de-un-espectro.html


[1] Parte del presente trabajo se nutre de las investigaciones realizadas por J. JAKOVIC, Cathy. “STR analysis following latent blood detection by Luminol, Fluorescein, and BlueStar”; en JOURNAL OF FORENSIC IDENTIFICATION 57 (2), 2007 \ Pág. 193 y ss.
[2] GUTIÉRREZ CHÁVEZ, Abel. “Manual de Ciencias Forenses y Criminalística”, 2º edición. Trillas. México, 2002.
[3] SILVEYRA, Jorge O.; citado por RODRÍGUEZ REGALADO, Pablo. “Criminalística General, Material de Consulta”. UNSA, Escuela de Postgrado. Arequipa, 2009.
[4] POLICIA NACIONAL DEL PERU. “Guía de procedimientos criminalísticos”. Lima, 2005.
[5] RODRÍGUEZ REGALADO, Pablo. Op. cit. Pág. 105.
[6] POLICÍA NACIONAL DEL PERÚ. “Manual de Criminalística”. Dirección de Criminalística. Lima, 2006.
[7] CASTELLÓ PONCE, A. y otros. “Revelado de manchas latentes: efectividad del luminol y evaluación de su efecto sobre el estudio del DNA.”. En CUADERNOS DE MEDICINA FORENSE Nº28, Sevilla. Abril ,2002. En línea, disponible en: http://scielo.isciii.es/pdf/cmf/n28/original2.pdf

[8] Disponible en:http://ellaboratoriodegwen.blogspot.com/2008/08/luminol-la-confidencia-de-un-espectro.html
[9] Disponible en:http://ellaboratoriodegwen.blogspot.com/2008/08/luminol-la-confidencia-de-un-espectro.html
[10] Ibid.
[11] Ibid.
[12] El Luminol es realmente la sustancia sin hidratar, pero también se le denomina con el mismo nombre a la disolución del verdadero Luminol con el agua destilada y la oxigenada al 15%.
[13]Disponible en:http://ellaboratoriodegwen.blogspot.com/2008/08/luminol-la-confidencia-de-un-espectro.html
[14] Ibid.
[15] Ibid.
[16] CIENCIA FORENSE 2007-2009, Revista On Line, Chile. Disponible en: http://www.novakit.com/%20Bluestar.htm , http://www.bluestar-forensic.com/
[17] CIENCIA FORENSE 2007-2009, Revista On Line, Chile. Disponible en: http://www.novakit.com/%20Bluestar.htm , http://www.bluestar-forensic.com/
[18]
[19] Ibid.
[20] Ibib

* La imagen de la daga y la pluma fue tomada de: EL TIEMPO ES UN DETALLE, disponible en: http://lucadimetrio.blogspot.com/2008_09_01_archive.html